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慢病毒細(xì)胞穩(wěn)定轉(zhuǎn)染:細(xì)胞轉(zhuǎn)染/轉(zhuǎn)導(dǎo)即把核酸導(dǎo)入細(xì)胞。常規(guī)轉(zhuǎn)染技術(shù)分為兩類:瞬時(shí)轉(zhuǎn)染和穩(wěn)定轉(zhuǎn)染。瞬時(shí)轉(zhuǎn)染外源DNA/RNA不整合到宿主染色體中,因此一個(gè)宿主細(xì)胞中可存在多個(gè)拷貝數(shù),產(chǎn)生高水平表達(dá),通常可持續(xù)幾天(1-3天)。穩(wěn)定轉(zhuǎn)染需要通過(guò)一些選擇性標(biāo)記來(lái)進(jìn)行反復(fù)篩選得到穩(wěn)定轉(zhuǎn)染的同源細(xì)胞系。里來(lái)生物主要使用脂質(zhì)體介導(dǎo)法,能夠轉(zhuǎn)染多種類型細(xì)胞,具有轉(zhuǎn)化率高、細(xì)胞持續(xù)穩(wěn)定表達(dá)和對(duì)細(xì)胞毒性小等特點(diǎn)。
慢/腺病毒細(xì)胞轉(zhuǎn)染:細(xì)胞轉(zhuǎn)染/轉(zhuǎn)導(dǎo)即把核酸導(dǎo)入細(xì)胞。常規(guī)轉(zhuǎn)染技術(shù)分為兩類:瞬時(shí)轉(zhuǎn)染和穩(wěn)定轉(zhuǎn)染。瞬時(shí)轉(zhuǎn)染外源DNA/RNA不整合到宿主染色體中,因此一個(gè)宿主細(xì)胞中可存在多個(gè)拷貝數(shù),產(chǎn)生高水平表達(dá),通常可持續(xù)幾天(1-3天)。穩(wěn)定轉(zhuǎn)染需要通過(guò)一些選擇性標(biāo)記來(lái)進(jìn)行反復(fù)篩選得到穩(wěn)定轉(zhuǎn)染的同源細(xì)胞系。里來(lái)生物主要使用脂質(zhì)體介導(dǎo)法,能夠轉(zhuǎn)染多種類型細(xì)胞,具有轉(zhuǎn)化率高、細(xì)胞持續(xù)穩(wěn)定表達(dá)和對(duì)細(xì)胞毒性小等特點(diǎn)。
質(zhì)粒轉(zhuǎn)染:外源DNA導(dǎo)入哺乳動(dòng)物細(xì)胞又可分為瞬時(shí)轉(zhuǎn)染和穩(wěn)定轉(zhuǎn)染。 瞬時(shí)轉(zhuǎn)染一般是指外源基因進(jìn)入受體細(xì)胞后,存在于游離的載體上,不整合到染色體,在外源DNA導(dǎo)入細(xì)胞1—4天后收獲轉(zhuǎn)染細(xì)胞對(duì)轉(zhuǎn)染基因的轉(zhuǎn)錄和復(fù)制進(jìn)行分析。 而穩(wěn)定轉(zhuǎn)染則需要使外源基因整合于細(xì)胞染色體從而得到穩(wěn)定的轉(zhuǎn)染細(xì)胞株。實(shí)現(xiàn)細(xì)胞的穩(wěn)定轉(zhuǎn)染,通常需要一個(gè)抗生素篩選的過(guò)程。
轉(zhuǎn)染(si/sh/miRNA):細(xì)胞轉(zhuǎn)染/轉(zhuǎn)導(dǎo)即把核酸導(dǎo)入細(xì)胞。常規(guī)轉(zhuǎn)染技術(shù)分為兩類:瞬時(shí)轉(zhuǎn)染和穩(wěn)定轉(zhuǎn)染。瞬時(shí)轉(zhuǎn)染外源DNA/RNA不整合到宿主染色體中,因此一個(gè)宿主細(xì)胞中可存在多個(gè)拷貝數(shù),產(chǎn)生高水平表達(dá),通常可持續(xù)幾天(1-3天)。穩(wěn)定轉(zhuǎn)染需要通過(guò)一些選擇性標(biāo)記來(lái)進(jìn)行反復(fù)篩選得到穩(wěn)定轉(zhuǎn)染的同源細(xì)胞系。里來(lái)生物主要使用脂質(zhì)體介導(dǎo)法,能夠轉(zhuǎn)染多種類型細(xì)胞,具有轉(zhuǎn)化率高。
誘導(dǎo)轉(zhuǎn)染mimic/inhibitor:microRNA (miRNA)是真核生物中一類內(nèi)源性的小非編碼RNA,長(zhǎng)度在22個(gè)核苷酸左右。自1993年科學(xué)家發(fā)現(xiàn)miRNA以來(lái),改變了我們對(duì)基因調(diào)控的認(rèn)識(shí)。從胚胎發(fā)育開(kāi)始,到細(xì)胞凋亡,乃至腫瘤生長(zhǎng),miRNA在一系列生理和病理過(guò)程中發(fā)揮著重要的作用。
管腔形成:在原有的毛細(xì)血管和(或)微靜脈基礎(chǔ)上通過(guò)血管內(nèi)皮細(xì)胞的遷移和增殖,從已存在的血管處以芽生或非芽生(套迭)形式形成新的、以毛細(xì)血管為主的血管系統(tǒng)過(guò)程稱之為血管生成,通過(guò)體外模擬血管生成的過(guò)程對(duì)研究血管形成機(jī)制、發(fā)現(xiàn)促進(jìn)或抑制血管生成藥物十分重要。
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