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細(xì)胞沉默/敲低樣本提取
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細(xì)胞沉默/敲低樣本提取:細(xì)胞轉(zhuǎn)染/轉(zhuǎn)導(dǎo)即把核酸導(dǎo)入細(xì)胞。常規(guī)轉(zhuǎn)染技術(shù)分為兩類:瞬時(shí)轉(zhuǎn)染和穩(wěn)定轉(zhuǎn)染。瞬時(shí)轉(zhuǎn)染外源DNA/RNA不整合到宿主染色體中,因此一個(gè)宿主細(xì)胞中可存在多個(gè)拷貝數(shù),產(chǎn)生高水平表達(dá),通常可持續(xù)幾天(1-3天)。穩(wěn)定轉(zhuǎn)染需要通過(guò)一些選擇性標(biāo)記來(lái)進(jìn)行反復(fù)篩選得到穩(wěn)定轉(zhuǎn)染的同源細(xì)胞系。里來(lái)生物主要使用脂質(zhì)體介導(dǎo)法,能夠轉(zhuǎn)染多種類型細(xì)胞,具有轉(zhuǎn)化率高、細(xì)胞持續(xù)穩(wěn)定表達(dá)和對(duì)細(xì)胞毒性小等特點(diǎn)。
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